反相C18 Flash色谱柱使用注意事项

过柱机biotage 26-01-19 14:20:17

之前我们讨论了很多关于反相色谱分离的各类实际操作案例和使用方案,但我们仍然收到很多的关于反相色谱柱使用问题的咨询,很多人对于什么是反相以及拥有了反相Flash色谱柱之后的使用和保存,仍然存在着很多疑问,今天我们为您列举了C18色谱柱在使用过程中的一些注意事项,希望对您的实验有所帮助。

图片
由于C18色谱柱是通过C碳链进行修饰而来,因此几乎不会对样品有强烈保留,从而保证了其具有可重复使用的特性,为了保证其具有较长的寿命,反相Flash色谱柱的使用规则往往和常规的正相有所区别。

图片
经典的反相硅胶表面的图示。C-18的烷基链键合在硅胶表面,增加了硅胶的疏水性。

使用前,色谱柱使用前需要使用100%有机溶剂(推荐乙腈)进行活化,低流速慢慢冲洗,这样可以使得C18链可以在整个有机溶剂体系中得到足够的伸展,使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使色谱柱的性能达到好状态。

反相C18在使用之后,需要保存在100%有机溶剂当中(推荐乙腈),切记不可吹干后保存,压干后容易使得C18键断裂,影响柱效和后期分离效果。

Flash C18色谱柱往往不可完全置于100% 水相当中,这样会使得C18链蜷缩,进而影响柱效。因此在起始比例设置方面,一般我们推荐从5% 或者10% 的有机相比例作为起始比例,请避免使用100%的纯水作为起始比例。因为在开始分离前,色谱柱保存在有机相当中,我们需要将100%有机相慢慢回调至起始比例,平衡一段时间后,才可开始正式分离。

一般反相 Flash C18色谱柱所支持的pH范围为:3-12之间,任何大于或者低于此数值的流动相体系都不有利于色谱柱寿命。

常规的两种反相C18流动相体系为:水-甲醇;水-乙腈。

在使用过程中的任何时候以及后期的保存,请不要将色谱柱干掉,一定要让其沉浸在溶剂之中。

流动相极性在进行转换时,跨度不宜过大,以免过度不匀,同时放热产生气泡影响分离、

在色谱柱使用完成后,需使用纯有机溶剂(乙腈或者甲醇)对对色谱柱进行冲洗,保证没有样品残留,如样品为离子型,则需要用10CV以上的溶剂冲洗,确保无残留。

若色谱柱处于长期闲置状态时,要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗10CV以上,保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液(如90%甲醇水,或者100%乙腈)中;

色谱柱在长时间使用中,压力会随着各种各样的样品的使用而形成缓慢上升的状况,如压力增大明显,可适时用大量甲醇或者乙腈进行冲洗,可使色谱柱恢复部分活性,提升一些柱效。/文:Biotage

仪器推荐
  1. Biospec Mini-Beadbeater-16珠磨式细胞破碎仪

    Biospec Mini-Beadbeater-16珠磨式细胞破碎仪

      Biospec Mini-Beadbeater-16:一种高能细胞破碎仪,旨在一次处理四到十六个样本。 Mini-BeadBeater-16 通过剧烈搅动 4 到 16 个 2 毫升螺旋盖微量瓶来破坏微生物细胞和植物和动物组织,其中含有小玻璃、陶……

    BIOSPEC 2026-01-22

  2. Organomation 45 位氮气蒸发器/45位进口氮吹仪

    Organomation 45 位氮气蒸发器/45位进口氮吹仪

        Organomation N-EVAP 45位氮吹仪/45位氮气蒸发器 Organomation 45 位氮气蒸发器(目录 # 11645)在我们的 N-EVAP 系列中提供多的样品位置。样品架有双圆环。外圈有 30 个位置,可容纳外径为 10-19 mm ……

    Organomation 2025-12-24

  3. MINITECH Mini-Mill/2 高精度数控铣床

    MINITECH Mini-Mill/2 高精度数控铣床

      Minitech CNC Mini Mill/2 是最近重新设计和改进的。提供经济实惠和高质量性能的数控铣床小部件制造。 从头开始,考虑到精度,我们的Mini-Mill/2在每个阶段都具有线性轴承和精密滚珠螺杆,确保了优异效果。……

    MINITECH 2026-01-22

  4. HIFU聚焦超声应用 Histotripsy 组织摧毁术/空化机械消融

    HIFU聚焦超声应用 Histotripsy 组织摧毁术/空化机械消融

    HIFU 聚焦超声应用 Histotripsy 组织摧毁术/空化机械消融 部分内容引述自[掌上超声应用],[医工超人],[医学镜界]等多个专业平台,感谢各位前辈。 Histotripsy 压力脉冲超声组织粉碎术,又称组织摧毁术(PSHT)是一种新……

    产品知识,仪器应用 2026-01-22

  5. Boekel Scientific RapidFISH 载玻片杂交仪,240200

    Boekel Scientific RapidFISH 载玻片杂交仪,240200

    Boekel Scientific RapidFISH 旨在简化 FFPE(福尔马林固定石蜡包埋组织)样品、细胞悬液和其他组织制备程序的荧光原位杂交 (FISH) 程序。温度控制和湿度对于 FISH 探针与 RNA 和 DNA 结合至关重要。RapidFISH 具有……

    Boekel,进口杂交箱 2026-01-22

  6. Sonic Concepts高频超声换能器:HIFU Plex LT™ 3D深度聚焦系统

    Sonic Concepts高频超声换能器:HIFU Plex LT™ 3D深度聚焦系统

    Sonic Concepts高频超声换能器 超声波应用-医疗,生物技术等 HIFU transducers高频超声换能器/高频超声换能探头/环形高功率超声探头/宽频超声空化 美国Sonic Concepts公司成立于1994年,HIFU(高频超声换能)技术致力……

    Sonic Concepts,聚焦超声 2026-01-07

今日仪器
  1. HIFU聚焦超声应用 Histotripsy 组织摧毁术/空化机械消融

    HIFU聚焦超声应用 Histotripsy 组织摧毁术/空化机械消融

    HIFU 聚焦超声应用 Histotripsy 组织摧毁术/空化机械消融 部分内容引述自[掌上超声应用],[医工超人],[医学镜界]等多个专业平台,感谢各位前辈。 Histotripsy 压力脉冲超声组织粉碎术,又称组织摧毁术(PSHT)是一种新……

    产品知识,仪器应用 2026-01-22

  2. MINITECH Mini-Mill/2 高精度数控铣床

    MINITECH Mini-Mill/2 高精度数控铣床

      Minitech CNC Mini Mill/2 是最近重新设计和改进的。提供经济实惠和高质量性能的数控铣床小部件制造。 从头开始,考虑到精度,我们的Mini-Mill/2在每个阶段都具有线性轴承和精密滚珠螺杆,确保了优异效果。……

    MINITECH 2026-01-22

  3. Boekel Scientific RapidFISH 载玻片杂交仪,240200

    Boekel Scientific RapidFISH 载玻片杂交仪,240200

    Boekel Scientific RapidFISH 旨在简化 FFPE(福尔马林固定石蜡包埋组织)样品、细胞悬液和其他组织制备程序的荧光原位杂交 (FISH) 程序。温度控制和湿度对于 FISH 探针与 RNA 和 DNA 结合至关重要。RapidFISH 具有……

    Boekel,进口杂交箱 2026-01-22

返回顶部小火箭